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細胞爬片的制備
2025-08-28
細胞爬片又名爬片。細胞爬片就是讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi)，細胞在玻片上生長，主要用于組織學(xué)，冰凍切片，細胞涂片，免疫組織化學(xué)，原位雜交等。下面給大家簡單介紹細胞爬片的制備。1.爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用爬片；2.應(yīng)用蓋玻片，可根據(jù)自己的需要剪裁成合適的大小，以備置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪，或者是口腔科的那種小沙輪，輕輕劃一下后，稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話，我一般不將蓋玻片切開，直接清潔后放入培養(yǎng)皿中，到染色時再將之...
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細胞復(fù)蘇的操作步驟及注意事項
2025-08-28
平時研究用的細胞，有需要冷凍保存。冷凍的過程稱為凍存，把凍上的細胞化開的過程叫細胞復(fù)蘇。細胞復(fù)蘇是一簡單的試驗操作，但操作中有許多需要注意的事項，在實驗操作中注意細小問題，才能使復(fù)蘇后的細胞狀態(tài)保持良好。細胞復(fù)蘇實驗準備：主要器材：一次性滴管、打火機、酒精燈、大鑷子、中鑷子、記號筆、廢液缸、封口膜、剪子。主要試劑：PBS、培養(yǎng)液、消化酶（胰酶）、75%酒精、雙抗。PBS配制：NaCL:4gKCL:0.1gNa2HPO4:1.745gKH2PO4:0.1g三蒸水：500mL，溶...
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細胞凍存與復(fù)蘇操作步驟與注意事項文檔
2025-08-28
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。一、原理在不加任何條件下直接凍存細胞時，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導(dǎo)致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護劑，可使冰點降低。...
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關(guān)于CCK8實驗步驟的敘述
2025-08-28
CCK-8為細胞增殖檢測試劑盒，細胞增殖是生物體的重要生命特征，細胞以分裂的方式進行增殖。必須強調(diào)指出，通過細胞分裂，可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì)，平均地分配到兩個子細胞中去?？梢姡毎鲋呈巧矬w生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。CCK8實驗步驟如下。CCK-8實驗步驟1、在96孔板中配置100μl的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時（37℃，5%CO2）。2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間（例如：6、12、24或48小時）。4、向...
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MTT法檢測細胞活性步驟及原理
2025-08-26
要知道MTT法檢測細胞活性步驟首先要知道MTT是什么？MTTMTT是一種粉末狀化學(xué)試劑，全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，漢語化學(xué)名為3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細胞活性原理檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無...
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MTT實驗步驟有哪些，有什么注意事項
2025-08-26
MTT通常用于藥物(也包括其他處理方式如放射線照射)對體外培養(yǎng)的細胞毒性的測定以及.細胞增殖及細胞活性測定。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經(jīng)濟。但是由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測。這不僅使工作量增加，也會對實驗結(jié)果的準確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗者也有損害。在MTT實驗步驟中要注意的是MTT有致癌性，用的時候小心,有條件最好帶那種透明的薄...
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簡述細胞培養(yǎng)的步驟
2025-08-26
細胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。現(xiàn)代生物技術(shù)一般認為包括基因工程技術(shù)、細胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關(guān)系，特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，細胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值。以下來具體講一下細胞培養(yǎng)的步驟。細胞培養(yǎng)的步驟一、細胞復(fù)蘇：1.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水浴鍋中回溫，回溫后噴以75%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。如配置：50mL完-全培養(yǎng)基(含10%FBS，1%青鏈霉素雙抗)44.5mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基+...
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動物外周血淋巴細胞分離液的注意事項
2025-08-26
使用的注意事項：1.開封前顛倒混勻，本分離液為無菌產(chǎn)品，為延長分離液保存時間，請在無菌條件下啟封，避免微生物污染。。2.分離液使用時應(yīng)始終保持室溫（18℃~25℃），如室內(nèi)溫度較低，可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心，可能會導(dǎo)致白膜層中紅細胞污染加重。3.血液樣本最好為新鮮抗凝血（采血2h以內(nèi)），為保持淋巴細胞的活性，應(yīng)避免冷凍和冷藏。4.稀釋血液或洗滌細胞，不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液，其成分會導(dǎo)致血細胞凝集，大大降低細胞得率及純度。5.部分塑料制品...
標準品
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